{"id":1931,"date":"2021-08-18T16:19:01","date_gmt":"2021-08-18T16:19:01","guid":{"rendered":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/?p=1931"},"modified":"2022-02-16T21:41:53","modified_gmt":"2022-02-16T21:41:53","slug":"evaluacion-comparativa-de-2-ensayos-clinicos-para-pruebas-de-enfermedades-transmitidas-por-vectores-en-perros","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/evaluacion-comparativa-de-2-ensayos-clinicos-para-pruebas-de-enfermedades-transmitidas-por-vectores-en-perros\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n comparativa de 2 ensayos cl\u00ednicos para pruebas de enfermedades transmitidas por vectores en perros"},"content":{"rendered":"\n

Las enfermedades caninas transmitidas por vectores (CVBD), incluida la enfermedad de Lyme, la ehrlichiosis y la anaplasmosis, son cada vez m\u00e1s prevalentes a medida que la distribuci\u00f3n de las garrapatas se expande a trav\u00e9s del cambio clim\u00e1tico, la migraci\u00f3n de la vida silvestre y el aumento de la reubicaci\u00f3n de animales de compa\u00f1\u00eda en todo el mundo. Tanto los perros como los humanos son susceptibles a la transmisi\u00f3n por garrapatas de Borrelia burgdorferi<\/em>, Anaplasma phagocytophilum<\/em>, Anaplasma platys<\/em>, Ehrlichia canis<\/em>, Ehrlichia ewingii<\/em>, Ehrlichia chaffeensis<\/em> y transmisi\u00f3n por mosquitos de Dirofilaria immitis<\/em>. Dado que muchos de estos organismos pueden causar enfermedades en perros y seres humanos, la detecci\u00f3n exhaustiva de la exposici\u00f3n y\/o la infecci\u00f3n a los CVBD en perros es importante desde el punto de vista diagn\u00f3stico para los veterinarios y epidemiol\u00f3gicamente importante para la vigilancia de la salud p\u00fablica y las intervenciones de control de vectores.<\/p>\n\n\n\n

Las infecciones por E. canis<\/em> en perros se diagnostican mediante la detecci\u00f3n microsc\u00f3pica de m\u00f3rulas en los monocitos circulantes o mediante la detecci\u00f3n de anticuerpos agudos y convalecientes mediante un ensayo de inmunofluorescencia (IFA) o un ensayo de PCR. El IFA puede detectar anticuerpos cruzados y reactivos en muestras de perros expuestos a E. ewingii<\/em>, E. chaffeensis<\/em> y potencialmente otras Ehrlichia spp<\/em>. El SNAP es la primera prueba r\u00e1pida que incorpor\u00f3 la identificaci\u00f3n de un p\u00e9ptido espec\u00edfico de E. ewingii<\/em> para hacer detecci\u00f3n de anticuerpos, as\u00ed como para Ehrlichia spp. Los signos cl\u00ednicos en los perros infectados con E. ewingii<\/em> pueden ser similares a los de E. canis<\/em>, como fiebre, letargo, anorexia, cojera (poliartritis) y, en algunos casos, trombocitopenia grave.<\/p>\n\n\n\n

As\u00ed mismo, para el diagn\u00f3stico de A. phagocytophilum<\/em> se puede identificar la m\u00f3rula en el microscopio en fase aguda, o mediante la amplificaci\u00f3n del DNA en PCR. Otros m\u00e9todos diagn\u00f3sticos, son la identificaci\u00f3n de Ac. con Ag. bacterianos en ELISA o por la prueba de IFA. En el caso de A. platys<\/em>, causa trombocitopenia c\u00edclica, y generalmente hay coinfecci\u00f3n con E. canis,<\/em> generando cuadros cl\u00ednicos m\u00e1s severos, debido a la garrapata Rhipicephalus sanguineus. <\/p>\n\n\n\n

La enfermedad de Lyme es causada por la B. burgdorferi<\/em>, el cuadro cl\u00ednico en perros se caracteriza por laminitis, anorexia y letargo. La detecci\u00f3n de Ac para el p\u00e9ptido C6 mediante ELISA o IFA es considerado altamente espec\u00edfico de la infecci\u00f3n natural, y no se encuentran en animales inmunizados con vacunas comerciales. <\/p>\n\n\n\n

El gusano del coraz\u00f3n es transmitido por mosquitos, su presentaci\u00f3n cl\u00ednica se caracteriza por letargo, tos e intolerancia al ejercicio, en caso dado de no ser tratada puede ser mortal. aunque tambi\u00e9n se pueden presentar casos subcl\u00ednicos. <\/p>\n\n\n\n

La detecci\u00f3n de CVBD y las coinfecciones en perros, es importante para los veterinarios, los animales, propietarios y la salud p\u00fablica, ya que algunos de estos vectores pueden infectar de igual manera a humanos. El SNAP test de IDEXX, es una prueba r\u00e1pida basada en la tecnolog\u00eda ELISA, que ha sido validada de manera masiva para la detecci\u00f3n simult\u00e1nea de Ac de A. phagocytophilum, A. platys, E. canis, E. ewingii, B. burgdorferi<\/em> y Ag de D. immitis.<\/em> El FLEX4 test de Abaxis, est\u00e1 comercialmente disponible para la detecci\u00f3n de anticuerpos de pat\u00f3genos transmitidos por vectores y ant\u00edgeno de D. immitis<\/em> en perros. No hay art\u00edculos publicados que comparen el comportamiento de estas 2 pruebas r\u00e1pidas con un test de referencia o \u201cGold standard\u201d. <\/p>\n\n\n\n

Materiales y m\u00e9todos<\/strong><\/p>\n\n\n\n

Se identificaron un total de 844 muestras de suero o plasma para evaluaci\u00f3n comparativa. Las muestras se almacenaron en un congelador a -20\u00b0 C hasta que se analizaron.<\/p>\n\n\n\n

Set de muestras para IFA – Ehrlichia canis; consisti\u00f3 en 68 muestras seroreactivas para IFA E. canis<\/em> y 86 no seroreactivas enviados al laboratorio de referencia IDEXX, Westbrook, de las cuales 47 proven\u00edan de E.E.U.U. y 107 de Europa. Los t\u00edtulos de los seroreactivos variaron entre 1:100 y > 3200, y se confirmaron mediante ELISA. Los perros incluidos en este conjunto de muestras se analizaron como un componente de la atenci\u00f3n veterinaria de rutina a la sola discreci\u00f3n del veterinario tratante.<\/p>\n\n\n\n

Los reactivos (p\u00e9ptidos o prote\u00ednas recombinantes) usados en estas pruebas de screening son molecularmente distintas a las utilizadas en el SNAP. Para este estudio los reactivos utilizados en el FLEX4 no han sido divulgados para permitir una evaluaci\u00f3n similar.<\/p>\n\n\n\n

Las muestras usadas para A. phagocytophilum <\/em>y B. burgdorferi<\/em> fueron remitidas al Laboratorio de referencia IDEXX, donde por medio de IFA se detectaron 71 muestras seroreactivas para A. phagocytophilum<\/em> con t\u00edtulos que var\u00edan entre 1:50 a > 3200, y los no seroactivos corresponden a 89 muestras. <\/p>\n\n\n\n

La identificaci\u00f3n de B. burgdorferi<\/em> se realiz\u00f3 utilizando el test OspA Line plus donde se evidenciaron 44 pacientes latentes a exposici\u00f3n y\/o infectados, y 61 seronegativos por WB.<\/p>\n\n\n\n

La identificaci\u00f3n y confirmaci\u00f3n de ant\u00edgeno de D. immitis<\/em> en 51 muestras se hizo mediante necropsia.<\/p>\n\n\n\n

La comparaci\u00f3n de la sensibilidad y especificidad de las pruebas SNAP y FLEX4, se realiz\u00f3 de manera aleatoria con muestras con etiqueta oculta de suero o plasma en cada test r\u00e1pido. Las pruebas fueron realizadas y visualmente interpretadas por 3 diferentes operadores de acuerdo a las instrucciones de manufactura. Los resultados fueron comparados con el m\u00e9todo de referencia para calcular sensibilidad y especificidad. <\/p>\n\n\n\n

Resultados<\/strong><\/p>\n\n\n\n

Sensibilidad y especificidad<\/strong><\/p>\n\n\n\n

Se analizaron un total de 844 muestras utilizando los ensayos SNAP 4Dx y FLEX 4. Ambos ensayos fueron le\u00eddos de forma independiente por 3 lectores. No se obtuvieron resultados de prueba \u201cno v\u00e1lidos\u201d con ninguno de los ensayos. Como se describe en los M\u00e9todos, todas las muestras fueron pre seleccionadas para esta evaluaci\u00f3n seg\u00fan la ubicaci\u00f3n geogr\u00e1fica y el ELISA de IFA, WB y \/ o especies espec\u00edficas. Se utilizaron pruebas de necropsia y ELISA PetsChek para identificar muestras positivas y negativas al ant\u00edgeno del gusano del coraz\u00f3n, respectivamente.<\/p>\n\n\n\n

\"\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Discusi\u00f3n<\/strong><\/p>\n\n\n\n

La capacidad de un ensayo r\u00e1pido en la cl\u00ednica para detectar con precisi\u00f3n los anticuerpos contra un organismo o sus ant\u00edgenos depende de varios factores. Los reactivos utilizados en los ensayos deben ser espec\u00edficos del analito y deben tener una sensibilidad muy alta para la detecci\u00f3n de anticuerpos o ant\u00edgenos. Adem\u00e1s, para los ensayos multiplex, los reactivos no deben reaccionar de forma cruzada ni interferir con los otros analitos utilizados en el mismo dispositivo.<\/p>\n\n\n\n

En este estudio, se utilizaron como muestras de referencia para anticuerpos de A. phagocytophilum<\/em>  determinados por IFA para comparar la sensibilidad y especificidad de las 2 pruebas, en donde el SNAP (84,5%) tuvo una sensibilidad mucho m\u00e1s alta que el FLEX4 (12,7%) para detecci\u00f3n de estos anticuerpos. El FLEX4 tambi\u00e9n tuvo un comportamiento variable de acuerdo a las titulaciones IFA, indicando que en muestras de campo se obtendr\u00e1n resultados falsos negativos en perros infectados o expuestos a A. phagocytophilum<\/em>.<\/p>\n\n\n\n

El m\u00e9todo de referencia para A. platys<\/em> fue el test de ELISA especie- espec\u00edfica, donde se us\u00f3 un p\u00e9ptido diferente al p30 usado en el SNAP. El FLEX4 tuvo una sensibilidad de 33% comparado con el SNAP, indicando que generar\u00e1 m\u00e1s de 50% de resultados falsos negativos, limitando as\u00ed su utilidad diagn\u00f3stica para Anaplasma<\/em> spp. <\/p>\n\n\n\n

Comparado con el SNAP (95,5%), el FLEX4  (40%) tiene una sensibilidad menor para la detecci\u00f3n de Ac. de B. burgdorferi<\/em> en perros, llevando as\u00ed a m\u00e1s del 50% de resultados falsos negativos como prueba de rutina. <\/p>\n\n\n\n

En este estudio, la sensibilidad de detecci\u00f3n de Ac. E. canis<\/em> en el SNAP es de 97,1%, lo que concuerda con estudios previos que reportan alta sensibilidad y especificidad; donde los 2 ant\u00edgenos usados para detectar Ac. antiehrlichia en el SNAP son p\u00e9ptidos inmunodominantes derivados de prote\u00ednas de superficie caracterizadas para E. canis, E. chaffeensis <\/em>y E. ewingii<\/em>. De igual manera, la sensibilidad del SNAP fue mayor que el FLEX4 (61.4%), en donde 17 de 57 muestras con t\u00edtulos de Ac. para E. canis <\/em>>1:1280 resultaron falsos negativos.<\/p>\n\n\n\n

Para  la detecci\u00f3n de Ag. de D<\/em>. immitis<\/em>, en este estudio tanto el SNAP como el FLEX4 tuvieron una especificidad del 100%, sin embargo la sensibilidad del FLEX4 (88%) fue menor que en el SNAP (94%). Hay muchos factores que pueden afectar la exactitud diagn\u00f3stica en pruebas para el Ag. del gusano del coraz\u00f3n, tales como el n\u00famero de gusanos, el g\u00e9nero, y la presencia de formas inmaduras o agonizantes.<\/p>\n\n\n\n

La habilidad de las pruebas r\u00e1pidas y su exactitud para determinar la exposici\u00f3n o infecci\u00f3n de 1 o m\u00e1s pat\u00f3genos transmitidos por ectopar\u00e1sitos es importantes para los veterinarios que eval\u00faan perros con signos cl\u00ednicos indicativos de CVBD, o para determinar coinfecciones que pueden requerir diferente manejo o tratamiento, y que hoy en d\u00eda han aumentado su prevalencia. <\/p>\n\n\n\n

Conclusiones<\/strong><\/p>\n\n\n\n

La precisi\u00f3n de cualquier prueba en la cl\u00ednica es de vital importancia para los veterinarios, las mascotas y los clientes al determinar la exposici\u00f3n o la infecci\u00f3n con uno o m\u00e1s pat\u00f3genos transmitidos por vectores. Basados en los resultados comparativos de este estudio, el SNAP es una prueba r\u00e1pida m\u00e1s sensible que el FLEX4 en la detecci\u00f3n de anticuerpos de A. phagocytophilum, A. platys, B. burgdorfri, E. canis, E. ewingii, E. chaffeensis<\/em> y ant\u00edgeno de gusano del coraz\u00f3n en perros. <\/p>\n\n\n\n

Tomado de:<\/strong><\/p>\n\n\n\n

  • Research Article:<\/strong><\/li>
  • Comparative Evaluation of 2 In-Clinic Assays for Vector-Borne Disease Testing in Dogs<\/strong><\/li>
  • Jiayou Liu, PhD, Jan Drexel, MS, Blaine Andrews, DV, Matt Eberts, DVM, Ed Breitschwerdt, DV, Ramaswamy Chandrashekar, MS,PhD.<\/strong><\/li><\/ul>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Las enfermedades caninas transmitidas por vectores (CVBD), incluida la enfermedad de Lyme, la ehrlichiosis y la anaplasmosis, son cada vez m\u00e1s prevalentes a medida que la distribuci\u00f3n de las garrapatas se expande a trav\u00e9s del cambio clim\u00e1tico, la migraci\u00f3n de la vida silvestre y el aumento de la reubicaci\u00f3n de animales de compa\u00f1\u00eda en todo […]<\/p>\n","protected":false},"author":2,"featured_media":3354,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"default","ast-site-content-layout":"default","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","ast-disable-related-posts":"","theme-transparent-header-meta":"default","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-opacity":"","overlay-gradient":""}},"_joinchat":[],"footnotes":""},"categories":[16],"tags":[],"class_list":["post-1931","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-idexx"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/1931","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/users\/2"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=1931"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/1931\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":1937,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/1931\/revisions\/1937"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3354"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=1931"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=1931"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/vetsandpetstrading.com\/cr-brand\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=1931"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}